常见细胞转染的方法

细胞转染，是将外源基因（DNA、RNA等）导入细胞内的一种专门技术。常用的转染方法有物理方法、化学方法、生物方法。虽然有多种细胞转染方法供我们选择，但要想达到一个理想的转染效率，需要仔细考虑选择合适的转染方法来进行细胞转染实验。

不同转染方法特点对比

物理法

电穿孔法

利用短暂的电脉冲电击细胞，使细胞膜被击穿小孔，核酸物质（DNA或RNA）在电泳力的作用下进入细胞膜，随后细胞本身的机制使这些物质到达细胞核处

优点：适用于各种细胞、转染效率高

缺点：需要专门的细胞电转仪、细胞死亡率比较高

适用范围：瞬时转染和稳定转染

显微注射法

通过显微操作将外源核酸物质直接注射到细胞内

优点：适用于各种细胞、效率可达到100%

缺点：需要专业的仪器、对操作技术的要求极高

使用范围：瞬时转染和稳定转染

化学法

脂质体转染法

阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用将核酸分子包裹入内，被表面带负电荷的细胞膜吸附进入细胞

优点：适用于大多数细胞、操作简单

缺点：对细胞有毒性、对不同类型转染效率差异较大

适用范围：瞬时转染和稳定转染

阳离子聚合物法

带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用，并通过内吞作用进入细胞

优点：适用于大多数细胞、操作简单

缺点：对细胞有毒性、对不同类型转染效率差异较大

适用范围：瞬时转染

磷酸钙共沉淀法

磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞

优点：成本较低、操作简单

缺点：对细胞有毒性、不适用于原代细胞

适用范围：瞬时转染和稳定转染

生物法

慢病毒介导法

通过包膜蛋白与细胞表面受体结合进入细胞

优点：操作简单、转染效率高、可以感染分裂期和非分裂期细胞、可以长期表达

缺点：包装容量有限，不适合构建片段特别长的基因

适用范围：瞬时转染和稳定转染

腺病毒介导法

通过纤突蛋白与细胞表面CAR结合进入细胞

优点：操作简单、转染效率高、可用于感染难转染的细胞

缺点：相比慢病毒免疫原性有点高

适用范围：瞬时转染

逆转录病毒介导法

通过病毒中膜糖蛋白和宿主细胞表面的受体相互作用而进入宿主细胞，之后反转录酶启动合成DNA并随机整合到宿主基因组中

优点：可用于难转染的细胞、原代细胞

缺点：载体容量比较小

适用范围：瞬时转染和稳定转染

1066vip威尼斯生物的转染试剂转染效率高，适用于大多细胞，并且转染的细胞仍保持很好的活性；普通细胞、难转染的原代细胞能够全面覆盖。1066vip威尼斯一共有4款转染试剂，除了上述提到的RNA转染试剂RNAFit和LipoFiter转染试剂，另外两款分别是LipoFiter 3.0高效转染试剂和LentiFit和慢病毒包装专用转染试剂。其中LipoFiter3.0转染试剂适用于适用于普通细胞系和难转染细胞系，转染效率高；慢病毒包装专用转染试剂则是适用于慢病毒包装共转染慢病毒质粒系统。